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淺談凝膠成像分析系統(tǒng)組成及各部件性能
  • 發(fā)布日期:2016-03-11     信息來源:      瀏覽次數(shù):2770
    • 凝膠成像系統(tǒng)的基本骨包含:CCD相機(jī),暗室和分析軟件。不過其功能不僅于對瓊脂糠凝膠進(jìn)行成像,現(xiàn)在的成像儀趨向于多功能化,還適用于蛋白膠、發(fā)熒光的膠、印跡膜和菌落平板等應(yīng)用。
           在Western Blot方面,高性能的CCD分子成像系統(tǒng)能與膠片媲美。 CCD是電荷耦合器件(Charge Coupled Device)的英文名稱縮寫,是一種光電轉(zhuǎn)換器件。是凝膠圖像系統(tǒng)的核心部件。絕大多數(shù)對數(shù)碼相機(jī)都有一定的了解,不少人還是這方面的專家。有人把數(shù)碼相機(jī)的像素看得很重,但比較之后發(fā)現(xiàn),有些400萬、500萬像素的相機(jī)拍出來的片子沒有300像素的機(jī)子拍出來的好,這是為什么?
           其實(shí),影響凝膠成像的因素很多,衡量CCD好壞的指標(biāo),有分辨率,CCD尺寸,動態(tài)范圍,靈敏度,量子效率,信噪比等,其中像素數(shù)以及CCD尺寸是重要的指標(biāo)。其實(shí)是說感光器件的面積大小,這里就包括了CCD感光器件的面積越大,也即CCD面積越大,捕獲的光子越多,感光性能越好,信噪比越低。 為了方便您更了解CCD的大小,現(xiàn)列舉目前市場上所應(yīng)用的CCD規(guī)格如下:
          1英寸——靶面尺寸為寬12.7mm*高9.6mm,對角線16mm。
          2/3英寸——靶面尺寸為寬8.8mm*高6.6mm,對角線11mm。
          1/2英寸——靶面尺寸為寬6.4mm*高4.8mm,對角線8mm。
          1/3英寸——靶面尺寸為寬4.8mm*高3.6mm,對角線6mm。
          1/4英寸——靶面尺寸為寬3.2mm*高2.4mm,對角線4mm。
          CCD的分辨率由低到高: 133萬左右,300萬左右,500萬左右,甚至還有更高的,根據(jù)CCD的溫度有可以分為常溫CCD相機(jī)和制冷CCD相機(jī),制冷CCD:在相同滿井電子的CCD,降低CCD噪音,就能提高CCD的監(jiān)測能力,熱或者暗電流對于CCD都是噪音,噪音在Cool CCD基本都可以被深度致冷的Peltier消除。在曝光超過5-10秒,CCD芯片就會發(fā)熱,沒有致冷設(shè)備的芯片,“熱”或者白的像素點(diǎn)就會遮蓋圖像,圖像到處可見雪花。CCD結(jié)構(gòu)設(shè)計、數(shù)字化的方法等都會影響噪音的產(chǎn)生。當(dāng)然通過改善凝膠成像系統(tǒng)結(jié)構(gòu)、優(yōu)化方法,同樣能減少噪音的產(chǎn)生。

          熒光及化學(xué)發(fā)光本身較弱,所以對CCD噪音的降低要求很高,應(yīng)選用高分辨率數(shù)字冷卻CCD相機(jī)結(jié)合高通透鏡頭系統(tǒng),使其能夠捕獲到信號極其微弱的熒光及化學(xué)發(fā)光樣品圖像,并且能夠zui大程度的降低噪音,減少背景,提供出色的圖像清晰度。另外可選激發(fā)光源及多位濾鏡輪擴(kuò)大了熒光/化學(xué)發(fā)光成像的應(yīng)用范圍。所以一般在熒光及化學(xué)發(fā)光觀察時需要選擇制冷CCD。所以制冷CCD相機(jī)是分子影像成像分析系統(tǒng)的未來的發(fā)展趨勢和必須要求。

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